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培養(yǎng)基的配制說(shuō)明
  培養(yǎng)基的配制
  1.配料
  配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。
  2.溶解
  淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀
  加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
  3.調(diào)PH
  用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。
  4.過(guò)濾
  濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。(有時(shí)可以省去)
  5.分裝
  一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
  (1)三角瓶
  若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,多不能超過(guò)150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。
  (2)試管分裝
  液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;
  固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。
  6.包扎
  分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。
  7.滅菌
  按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。
  8.擺斜面
  滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2。
  9.貯存
  培養(yǎng)基在30℃下放置,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。

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