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ELISA試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度
  ELISA試劑盒回收率是什么意思?
 
  回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說(shuō)你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定, 樣品水中含有無(wú)機(jī)氯 20 mg/L, 取 100mL 被測(cè)水樣品, 加入 0.1mL 濃度為 10mg/mL 的含無(wú)機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品, 測(cè)定時(shí)忽略體積變化, 如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為 2.98mg/L, 則認(rèn)為回收率為 98%。對(duì)于定量檢測(cè)來(lái)說(shuō),主要還是一個(gè)準(zhǔn)確度的驗(yàn)證。
 
  相對(duì)回收率可能會(huì)高于滿百的,如果只是說(shuō)“損失程度”,其實(shí)是不準(zhǔn)確的。應(yīng)該說(shuō),回收率越接近滿百,說(shuō)明這個(gè)試劑盒的準(zhǔn)確度越高。
 
  elisa試劑盒步驟如下:
 
  1.首先用包被緩沖液將已知抗原稀釋到1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜;
 
  2.第二日日洗滌3次;
 
  3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;
 
  4.(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;
 
  5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌; 最后一遍用DDW洗滌。
 
  6.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
 
  7.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
 
  8.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
 
  操作以上步驟完畢后,就可以知道結(jié)果了。

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