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分享一下LB培養(yǎng)基的使用要點(diǎn)
  使用前經(jīng)過清潔消毒,LB培養(yǎng)基清潔與否對工作影響較大,可影響培養(yǎng)基的酸鹼度,若有某些化學(xué)藥品的存在,會(huì)抑制細(xì)菌的生長。新購的培養(yǎng)基應(yīng)先用熱水沖洗,再置于 1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時(shí),使游離鹼性物質(zhì)除去(或用砂皂洗刷),再用蒸餾水沖洗二次,若要培養(yǎng)細(xì)菌再用高壓蒸氣滅.菌(一般在15磅高壓蒸氣),即120 ℃的溫度下30分鐘滅菌,置室溫中于燥,或用干熱滅菌,就是將培養(yǎng)基置于烘箱內(nèi),溫度控制在120 ℃左右的情況下維持2小時(shí),即可殺死細(xì)菌的胞芽。經(jīng)過消毒的培養(yǎng)基才能接種培養(yǎng)使用。
 
  LB培養(yǎng)基通常使用固體培養(yǎng)基制成平板培養(yǎng)(就是平板皿名稱的由來),平板培養(yǎng)基制作是將已裝好的滅菌瓊脂培養(yǎng)基,用溫水(無菌)熔化,取下試管的棉花塞,管口于酒精燈火焰上通過,然后微啟滅菌的培養(yǎng)基蓋,使試管口能深入為宜,傾入培養(yǎng)基后即可蓋密,再輕輕的搖勻傾入的培養(yǎng)基,使之均勻的、分布于皿底上疑結(jié),即得平板培養(yǎng)基。由于細(xì)菌的繁殖、發(fā)育生長是與所供給的培養(yǎng)基(營養(yǎng))有直接關(guān)系,尤其是作定量檢驗(yàn)分祈,對提供營養(yǎng)物的多少,有決定意義,細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)對營養(yǎng)物提供的多少,是否均勻,這對于培養(yǎng)基、皿底是否平整極為重要。如培養(yǎng)基皿底不平,瓊脂的培養(yǎng)基分布的厚薄隨坩喬皿皿底是否平整而有厚有薄,薄的部分營養(yǎng)供給就不足,這對定量分析有著密切關(guān)系,故對定量培養(yǎng)基皿底要求特別平整的原因所在。但作一般定性培養(yǎng)基(檢驗(yàn)細(xì)菌、菌落生長、繁殖等),使用普通培養(yǎng)基即可。
 
  細(xì)菌的分離培養(yǎng),一般標(biāo)本中常同時(shí)混有數(shù)種細(xì)菌,如口腔咽喉菌及耳朵的分泌物、痰液、小便、大便等,凡需研究的細(xì)菌,須先用分離培養(yǎng)法,使其成為純培養(yǎng),通過對一細(xì)菌作純培養(yǎng),用肉汁加2%瓊脂的固體培養(yǎng)基,經(jīng)保溫漏斗以脫脂棉花過濾,注入試管中,二天后檢驗(yàn)新菌,再投入培養(yǎng)基內(nèi),先制成平板,在無菌的條件下進(jìn)行接種,接種后把培養(yǎng)基倒置移入25一一30 ℃的恒溫箱內(nèi)(倒置是避免水蒸氣凝成液滴滴人皿底內(nèi),影晌菌落的生長),通過培養(yǎng)進(jìn)一步觀察細(xì)菌的形態(tài)和色澤,研究致病的病菌,以及對它防治的效果。

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