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LB培養(yǎng)基的兩種滅菌方法分享
  今天小編給大家講講LB培養(yǎng)基的滅菌方法:
 
  1、高壓蒸汽滅菌:
 
  高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在愛(ài)制備過(guò)程中混入各種雜菌,分裝后應(yīng)立即滅菌,至少應(yīng)在24h內(nèi)完成滅菌工作。滅菌時(shí)一般是在0.105MPa壓力下,溫度121℃時(shí),滅菌15~30min即可。消毒時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),也不能超過(guò)規(guī)定的壓力范圍,否則有機(jī)物質(zhì)特別是維生素類(lèi)物質(zhì)就會(huì)在高溫下分解,失去營(yíng)養(yǎng)作用,也會(huì)使培養(yǎng)基變質(zhì)、變色,甚至難以凝固。將蒸餾水或自來(lái)水裝在三角瓶中,裝水量一般不超過(guò)瓶的2/3,用牛皮紙或硫酸紙包扎封口,然后放入高壓鍋中滅菌后即為無(wú)菌水。 滅菌后的培養(yǎng)基可放到培養(yǎng)室中預(yù)培養(yǎng)3d,若無(wú)污染現(xiàn)象,則證明滅菌是*的,可以使用。暫時(shí)不用的培養(yǎng)基最好置于10℃下保存。含IAA或GA3的培養(yǎng)基應(yīng)在1周內(nèi)用完,其他培養(yǎng)基最多也不要超過(guò)1個(gè)月。
 
  2、過(guò)濾滅菌:
 
  一些植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及有機(jī)物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇熱容易分解,不能與培養(yǎng)基一起進(jìn)行高溫滅菌,而要使用細(xì)菌過(guò)濾器濾去其中的雜菌。細(xì)菌過(guò)濾器與濾膜(孔徑0.45微米)使用之前要先進(jìn)行高壓滅菌。過(guò)濾后的溶液要立即加入培養(yǎng)基中,若為液體培養(yǎng)基,可在培養(yǎng)基冷卻至30℃時(shí)加入;若為固體培養(yǎng)基,必須在培養(yǎng)基凝固之前(50-60℃)加入,振蕩使溶液與其他成分混合均勻。

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